A microscopia Raman aprimorada oferece imagens químicas mais claras de amostras criofixadas
Compreender o comportamento das moléculas e células que compõem nosso corpo é fundamental para o avanço da medicina. Isto levou a um esforço contínuo por imagens claras do que está acontecendo além do que os olhos podem ver. Em um estudo publicado recentemente na Science Advances, pesquisadores da Universidade de Osaka relataram um método que fornece imagens de microscopia Raman de alta resolução.
A microscopia Raman é uma técnica útil para imagens de amostras biológicas porque pode fornecer informações químicas sobre moléculas específicas – como proteínas – que participam dos processos do corpo. No entanto, a luz Raman proveniente de amostras biológicas é muito fraca, por isso o sinal pode muitas vezes ser inundado pelo ruído de fundo, resultando em imagens de baixa qualidade.
Os pesquisadores desenvolveram um microscópio que pode manter a temperatura de amostras previamente congeladas durante a aquisição. Isto permitiu-lhes produzir imagens até oito vezes mais brilhantes do que as obtidas anteriormente com microscopia Raman.
“Uma das principais razões para imagens desfocadas é o movimento das coisas que você está tentando ver”, explica o principal autor do estudo, Kenta Mizushima. “Ao obter imagens de amostras congeladas que não conseguiam se mover, poderíamos usar tempos de exposição mais longos sem danificar as amostras. Isso levou a sinais elevados em comparação com o fundo, alta resolução e campos de visão maiores.” A técnica não utiliza manchas e não requer produtos químicos para fixar as células na posição, por isso pode fornecer uma visão altamente representativa dos processos e do comportamento celular.
A equipe também conseguiu confirmar que o processo de congelamento conservou os estados físico-químicos de diferentes proteínas. Isso dá à abordagem de criofixação uma vantagem distinta de alcançar o que os métodos de fixação química não conseguem.
“A microscopia Raman adiciona uma opção complementar à caixa de ferramentas de imagem”, diz o autor sênior Katsumasa Fujita. “O facto de não só fornecer imagens celulares, mas também informações sobre a distribuição e estados químicos específicos das moléculas, é muito útil quando nos esforçamos continuamente para alcançar a compreensão mais detalhada possível.”
